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人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(HCC827)

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(HCC827)

產(chǎn)品時(shí)間:2019-04-11

簡(jiǎn)要描述:

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(HCC827)公司一直腳踏實(shí)地,深耕市場(chǎng),洞察廣大消費(fèi)者的需求,為消費(fèi)者提供高品質(zhì)產(chǎn)品而努力,一切從客戶需求出發(fā),為客戶需求打造專業(yè)的細(xì)胞產(chǎn)品,是我司能一直跑在市場(chǎng)前沿的秘訣所在,為回饋客戶,特展開(kāi)8折優(yōu)惠溫暖沖擊波活動(dòng),盡情享受吧!

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人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(HCC827)
細(xì)胞介紹
這株細(xì)胞建于 1994 年三月。這株肺腺癌在 EGFR 酪氨酸激酶區(qū)域有一個(gè)獲得性突變(E746-A750 缺失)?;颊咴?25 歲到 26 歲時(shí)每個(gè)月抽 1 包煙。在診斷前 12 年不再抽煙。
 
細(xì)胞特性
1.  來(lái)源:肺腺癌
2.  形態(tài) :上皮細(xì)胞樣
3.  含量:>1x10 6 個(gè)/mL
4.  污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5.  規(guī)格:T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝
 
運(yùn)輸和保存:使用含有胎牛血清的 2ml 凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在 1000RPM,常溫條件下,離心 5min 后,于潔凈操作臺(tái)棄去上清,加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移10cm 培養(yǎng)皿或者 T25 培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
 
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(HCC827)細(xì)胞用途:僅供使用。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一. 培養(yǎng)基 及 培養(yǎng) 凍存 條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,添加NaHCO 3 1.5g/L,D-葡萄糖 2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37 攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
 
二. 細(xì)胞 處理 :
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 2ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 到 1:5 的比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約 1ml 含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加 10%DMSO 后進(jìn)行凍存。
 
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(HCC827)注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們電聯(lián)。
2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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