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兔出血癥病毒抗體(RHDV Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

點擊次數(shù):1155 發(fā)布時間:2019/11/28
提 供 商: 上海酶聯(lián)生物科技有限公司 資料大?。?/td>
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兔出血癥病毒抗體(RHDV Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
檢測范圍:96T
使用目的:本試劑盒用于測定兔血清、血漿及相關(guān)液體樣本中出血癥病毒抗體(RHDV Ab) 滴度表達。實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標本中兔出血癥病毒抗體(RHDV Ab) 滴度表達。用純化的兔出血癥病毒(RHDV)抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中出血癥病毒抗體(RHDV Ab)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標記的出血癥病毒(RHDV) 抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中兔出血癥病毒抗體(RHDV Ab)滴度表達情況。

試劑盒組成 

兔出血癥病毒抗體(RHDV Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒標本要求 
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μl。然后將樣本以不同的稀釋比例上樣,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn))。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。


操作程序總結(jié):


計算和結(jié)果判定:
  試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
樣本滴度的判定:樣本從陽性變?yōu)殛幮缘哪莻€稀釋倍數(shù)為出血癥病毒抗體(RHDV Ab) 滴度表達值。

。 
兔出血癥病毒抗體(RHDV Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月

 
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