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今日課堂:競(jìng)賽法測(cè)抗體的實(shí)驗(yàn)原理
更新時(shí)間:2019-12-06   點(diǎn)擊次數(shù):1199次

當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除掉,或不易得到足夠的純化抗原時(shí),可用此法檢測(cè)特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競(jìng)賽與固相抗原結(jié)合。

 

標(biāo)本中抗體量越多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,因此陽(yáng)性反響呈色淺于陰性反響。如抗原為高純度的,可直接包被固相。如抗原中會(huì)有干擾物質(zhì),直接包被不易成功,可選用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體,然后參加抗原,構(gòu)成固相抗原。

 

洗刷除掉抗原中的雜質(zhì),然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進(jìn)行競(jìng)賽結(jié)合反響。競(jìng)賽法測(cè)抗體有多種形式,可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競(jìng)賽結(jié)合,抗HBc 。

 

ELISA一般選用此法。另一種形式為將標(biāo)本與抗原一起參加到固相抗體中進(jìn)行競(jìng)賽結(jié)合,洗刷后再參加酶標(biāo)抗體,與結(jié)合在固相上的抗原反響??笻Be的檢測(cè)一般選用此法。 
 
小分子抗原或半抗原因缺少可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定,能夠選用競(jìng)賽法形式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)賽與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少,終的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測(cè)定多用此法。

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