七月的天空,風(fēng)已不在輕柔,陽光通透。瞧,上海酶聯(lián)生物也開始為大家詳細(xì)解析酶聯(lián)免疫診斷技術(shù)的那些事兒啦!
酶聯(lián)免疫診斷技術(shù)的發(fā)展:
酶聯(lián)免疫吸附診斷技術(shù)是以酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)為基礎(chǔ)的測定技術(shù)。由于抗體可以高度特異與抗原分子結(jié)合,因此通過抗原-抗體的特異性識別反應(yīng)來進行檢測就可以成為一種簡便的檢測程序。
酶聯(lián)免疫吸附試驗,創(chuàng)始于1971年,當(dāng)時,瑞典學(xué)者Engvail和Perlmannn,荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法,稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗。ELISA是免疫測定技術(shù)中應(yīng)用zui廣,zui有發(fā)展前途的一種技術(shù),可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
當(dāng)初發(fā)展的免疫酶測定方法,是使酶與抗體或抗原結(jié)合,用以檢查組織中相應(yīng)的抗原或抗體的存在。后來發(fā)展為將抗原或抗體吸附于固相載體,在載體上進行免疫酶染色,底物顯色后用肉眼或分光光度計判定結(jié)果。
酶聯(lián)免疫測定方法及原理:
酶免疫測定方法的基本原理是先將已知的抗體或抗原結(jié)合在某種固形載體上,并保持其免疫活性。測定時,將待檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同步驟與固相載體表面吸附的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)。用洗滌的方法分離抗原抗體復(fù)合物和游離成分。然后加入底物顯色,根據(jù)顏色深淺進行定性或定量測定。
自1971年酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)建立以來,其技術(shù)已經(jīng)日趨成熟,*經(jīng)典的當(dāng)屬Clark和Adams于1977年建立的雙抗原夾心法。后來人們又建立了許多改進的方法,成功地用于病毒的檢測與鑒定。根據(jù)檢測目的和操作步驟的不同,常用的酶聯(lián)免疫吸附測定方法有兩種類型。用于測定抗原的技術(shù)類型有雙抗體夾心法、雙位點一步法和競爭法;用于測定抗體的技術(shù)類型有間接法、雙抗原夾心法和競爭法。此外,還有捕獲法。
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